Reactivii biochimici furnizați de Abcam constituie o gamă largă de substanțe de înaltă puritate, proiectate pentru a interfera, activa sau inhiba căi moleculare, receptori și enzime-cheie din biologia celulară și moleculară. Acești compuși sunt esențiali în experimente fundamentale și aplicate care vizează elucidarea mecanismelor fiziologice, patofiziologice sau farmacodinamice la nivel molecular.
- Agoniști și antagoniști
- Această categorie include molecule mici sintetice sau semisintetice care interacționează cu receptori celulari — de obicei proteine transmembranare, cum ar fi receptorii cuplați cu proteina G (GPCR), receptorii ionici, receptorii nucleari sau receptorii de tirozin-kinază.
- Agoniștii mimează ligandul endogen și induc o schimbare conformațională a receptorului, activând astfel calea de semnalizare intracelulară asociată. Aceștia sunt utilizați pentru a induce în mod controlat un răspuns celular, facilitând studiul expresiei genice dependente de receptor, fosforilarea substraturilor intracelulare sau mobilizarea calciului intracelular.
- Antagoniștii se leagă de receptor fără a-l activa, inhibând astfel legarea ligandului nativ și blocând transmiterea semnalului. Sunt utilizați pentru studii de pierdere de funcție (loss-of-function), maparea selectivității receptorilor și identificarea punctelor critice ale căilor de semnalizare.
- Exemple de aplicații: evaluarea farmacologică a receptorilor adrenergici, muscarinici, purinergici, dopaminergici etc., în sisteme celulare heterologe sau primare.
- Activatori și inhibitori enzimatici
- Acești reactivi biochimici sunt molecule capabile să moduleze în mod specific activitatea enzimatică, fie prin stabilizarea formei active a enzimei (activatori), fie prin interferarea cu centrul activ sau cu situsurile alosterice (inhibitori).
- Activatorii enzimatici sunt relativ mai puțin frecvenți și sunt utilizați pentru a studia dinamica reacțiilor catalizate de enzime în prezența cofactorilor sau a modificărilor conformaționale.
- Inhibitorii enzimatici se clasifică în:
- Inhibitori competitivi: se leagă reversibil de situsul activ, imitând substratul.
- Inhibitori non-competitivi: se leagă de situsuri alosterice, schimbând structura enzimei.
- Inhibitori ireversibili: formează legături covalente cu enzima, ducând la inactivarea permanentă.
- Sunt utilizați pe scară largă pentru blocarea kinazelor și fosfatazelor (de ex. PI3K, MAPK, CDK), inhibarea histon-deacetilazelor (HDAC), inhibarea enzimei caspază în studiile de apoptoză, respectiv cercetarea ciclului celular, proliferării și diferențierii celulare.
- Inhibitori ai proteazomilor
- Proteazomii sunt complexe multicatalitice implicate în degradarea proteinelor marcate cu ubiquitină, reglând astfel homeostazia proteică, ciclul celular și răspunsul la stres celular.
- Inhibitorii proteazomilor, cum ar fi MG-132, Bortezomib sau Lactacystin, se leagă de subunitățile catalitice ale proteazomului 20S și blochează activitatea chymotriptică, tryptică și de tip caspază.
- Acești inhibitori sunt esențiali în: studiul acumulării de proteine instabile sau modificate post-translațional, inducerea stresului reticulului endoplasmatic (ER stress), analiza semnalizării NF-κB prin stabilizarea IκB și cercetarea cancerului, în special a mielomului multiplu, unde inhibarea proteazomului induce apoptoza selectivă a celulelor tumorale.
- Reactivi pentru stres oxidativ
- Această categorie include atât compuși pro-oxidanți, cât și antioxidanți. Ei sunt utilizați pentru a modela stresul oxidativ celular și pentru a studia răspunsurile celulare la ROS (Reactive Oxygen Species), RNS (Reactive Nitrogen Species) și stres redox.
- Pro-oxidanți: cum ar fi peroxidul de hidrogen (H₂O₂), rotenona sau doxorubicina, induc formarea de ROS în mitocondrii sau în citoplasmă. Sunt folosiți pentru: simularea ischemiei celulare, inducerea apoptozei mediate de mitocondrii, evaluarea eficienței sistemelor antioxidante endogene (GSH, catalază, SOD).
- Antioxidanți: precum N-acetilcisteina (NAC), Trolox, resveratrol sau glutathion redus (GSH), neutralizează speciile reactive și sunt utilizați pentru a proteja celulele de moarte oxidativă.
- Sunt aplicați în modele celulare pentru: neurodegenerare (Alzheimer, Parkinson), inflamație cronică, boli cardiovasculare și diabet.
- Alți compuși relevanți:
- Chelatori de metale: EDTA, deferoxamină – pentru studii care implică ioni metalici esențiali în activitatea enzimatică.
- Inhibitori ai transportorilor: cum ar fi inhibitori ai SGLT, GLUT sau ABC transporters, pentru cercetări în farmacocinetică și boli metabolice.
- Modulatori epigenetici: inhibitori de DNMT, HAT și HDAC, cu rol în reprogramarea expresiei genice.
Controalele și accesoriile experimentale (Reagents, Controls & Accessories) sunt esențiale pentru obținerea unui context experimental valid, standardizat și reproductibil. Ele nu influențează direct căile biologice, ci susțin și optimizează condițiile de reacție și detecție.
Categorii funcționale:
- Controale pozitive și negative:
- Probe liofilizate standardizate sau proteine recombinante care asigură validarea funcționării corecte a anticorpilor și a kiturilor (ex. ELISA, Western blot).
- Utilizate pentru determinarea pragului de semnal și pentru calibrarea echipamentelor de detecție.
- Tampoane și soluții de blocare:
- PBS, TBS, BSA, ser normal, Tween-20 – reduc zgomotul de fond și previn legarea nespecifică a anticorpilor.
- Indispensabile în imunohistochimie, imunocitochimie și imunofluorescență.
- Soluții pentru colorare și detecție:
- DAB, AEC, TMB pentru detecția cromogenă.
- Fluorofori precum Alexa Fluor 488/594 pentru detecția fluorescentă.
- Reagenți pentru clarificarea tisulară (ex. Tissue Clearing Reagent 1/2) care cresc transparența probelor și permit imagistica 3D profundă.
- Reactivi pentru oprirea reacțiilor (stop solutions):
- Soluții acide pentru oprirea reacțiilor enzimatic-catalizate în ELISA, pentru standardizarea semnalului și prevenirea dezvoltării excesive a culorii.
- Reactivi pentru liză celulară:
- Buffere cu/din fără detergent, cu inhibitori de protează sau fosfatază – pentru extragerea proteinelor native din culturi celulare sau țesuturi.
Integrare experimentală
- Împreună, aceste produse oferă un cadru complet pentru investigarea moleculară riguroasă, acoperind:
- etapele de preprocesare (liză, blocare, diluție),
- manipularea țintită a funcțiilor moleculare (inhibiție, activare),
- validarea experimentală (controale, etaloane),
- vizualizarea calitativă și cantitativă (detecție cromogenă, fluorescentă, clarificare tisulară).